분야
hwpⅡ. Materials and Method
Ⅲ. Results
Ⅳ. Discussion
Ⅴ. Reference
생명체의 유전정보를 담고 있는 DNA는 그 중요성을 인정받아 21세기 유전공학 연구에 있어 연구가 많이 진행된 대상 중 하나이다. 그래서 이번 module 3에선 DNA 연구에 있어 흔하게 사용되는 DNA cloning, colony PCR, gel running 기법에 대해 알아보고자 한다. 이를 위해 대장균을 competent cell로 변형시켜 플라스미드를 재조합하는 단계, white colony를 colony PCR하는 단계, restriction enzyme으로 DNA를 잘라 gel running 하는 단계 순서로 실험을 진행했고 Gel documentation system으로 DNA band의 차이가 발생하는 것을 관찰했다. 이를 통해 이번 module 3에서 electroporation, 세균배양법, 제한효소 처리 및 전기영동법, PCR 등 DNA 연구에 사용되는 기본적인 실험기법을 학습할 수 있을 것이라 기대한다.
Ⅰ. Introduction
1950년대 제임스 왓슨과 프랜시스 크릭에 의해 DNA의 이중나선 구조가 증명된 이후로 DNA에 관한 연구는 끊임없이 이어져왔다. 현대에 들어와 개발된 DNA 연구기술을 DNA technology라고 하는데 여러 유전공학적 기술이 있지만 그중 가장 base가 되는 기술을 고르라 한다면 DNA cloning, PCR, Enzyme cut & Gel Electrophoresis를 들 수 있다. DNA cloning이란 DNA를 자르거나 잇는 등의 조작을 거쳐 세포에 도입하고 복제함으로써, 무수히 많은 DNA 사본을 얻는 유전공학의 기법이다. 이 기술은 DNA의 염기서열이 너무 많다는 배경 때문에 특정 DNA 부분만 선택적으로 획득하기 위해서 개발되었다.
(2). David M. Hills. Principles of Life (second edition) Life Science: Seoul, 254 (2015)
(3). Drawz, S. M.; Bonomo, R. A. (2010). 'Three Decades of β-Lactamase Inhibitors'. Clinical Microbiology Reviews. 23 (1): 160–201.
(4). David M. Hills. Principles of Life (second edition) Life Science: Seoul, 255 (2015)
(5). Molecular cloning, A Laboratory manual (Green and Sambrook, 4판 Cold Spring Harbor Laboratory Press), 분자생물학 (Weaver저, 5판, 라이프사이언스).
(6). Richard J. Simpson, Proteins and Proteomics(2003), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Chapter 7. Peptide Mapping and Sequence Analysis of Gel-Resolved Proteins.
(7). Molecular cloning, A Laboratory manual (Green and Sambrook, 4판 Cold Spring Harbor Laboratory Press), 분자생물학 (Weaver저, 5판, 라이프사이언스)
(8). Sanger, F., Coulson, A. R. (1975) A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase. J Mol Biol 94, 441–8