[유가공학 및 실험] 총균수 결과
2. Apparatus & Reagent
3. Procedure & Method
4. Result
5. Discuss
총미생물수를 측정하는 Agar Plate Count 또는 Standard Plate Count(SPC)는 공기, 물, 각종의 식품을 비롯한 액체 및 고체 시료내 생존 미생물수 측정에 가장 많이 사용되는 방법이다. 이 방법은 37℃에서 48시간 정도 배양하여 aerobic 또는 facultatively anaerobic & mesophilic bacteria수를 측정하며 미생물은 주어진 한가지 배지, 한가지 배양조건에서 모두 성장하여 균락을 형성할 수 없기 때무에 주어진 배지와 배양조건에서 얻어진 단위 시료량당 균락수(colony forming units, cfu)로 표현된다. 식품공전에 의하면 살균된 시유와 배양시키지 않은 유제품은 세균수가 1ml당(또는 1g당) 40,000을 넘지 않아야 하며 대장균수는 10이하이어야 한다고 명시되어 있고 발효유는 유산균수가 1ml당 10,000,000개 이상(단, 농후발효유는 100,000,000개 이상)이어야 한다고 명시되어 있다.
2. Apparatus & Reagent
① petri dish, alcohol lamp, test tube, rack, dilution bottle, jar, spatula, beaker, serological pipet(1ml, 10ml), 분무기, 삼각플라스크
② incubator, autoclave, vortex mixer, colony counter, chemical balance, water bath
③ lactobacili MRS broth, agar powder, ethyl alcohol(70%), peptone, anaerobic system envelop, Al foil
④ 각종 시유 및 발효 유제품
3. Procedure & Method
· Lactobacilli MRS 배지 사용 시
① 증류수 1000ml에 MRS broth 55g을 가열하며 녹인다.
② 0.1% peptone 용액을 제조한 후 test tube에 9ml씩 그리고 dilution bottle에 90ml씩 분주한다.
③ 사용하는 시료를 제외한 모든 기구와 배지는 autoclave를 이용하여 멸균시킨다.
④ 시료(0~4℃에서 보관) 10ml를 dilution bottle에서 90ml 0.1% peptone용액과 혼합한 후 (10-1) 멸균된 serological pipet(1ml)으로 희석 용액 1ml를 취하여 9ml씩 분주되어 있는 test tube에 넣어 혼합시키고 다시 이 test tube에서 1ml를 취하여 위와 같은 방법으로 희석배율을 높여나간다.(시유 : 10-3까지, 요구르트 : 10-8까지)
⑤ petri dish에 45도로 유지시킨 멸균된 배지를 약 15~20ml씩 넣고 뚜껑을 덮은 후 배지가 굳기 전에 회전시켜 배지에 희석액이 고루 잘 섞이도록 한 뒤 상온에 방치 후 응고시킨다.
⑥ 혐기성균(microaerophilic bacteria)을 배양시키는 것이므로 Jar안에서 petri dish와 anaerobic system envelop를 넣어 37℃, 약 48시간동안 혐기 배양시킨다.
⑦ 배양이 끝난 petri dish의 균락수를 colony counter에서 측정한다.
4. Result

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